dna的粗提取与鉴定 dna的粗提取与鉴定酒精浓度

卡尔顿高习 2024-07-03 09:51 1

粗提取DNA的不同方法及其原理

2mol/L的溶液

实验原理

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dna的粗提取与鉴定 dna的粗提取与鉴定酒精浓度


而蛋白质溶解度随物质的量浓度减小而增大

DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为

2mol/L时,DNA的溶解度,浓度为

0.14

mol/L时,DNA的溶解度。利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。

DNA不溶于95%的酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

DNA中含有脱氧核糖,能与(沸水浴)反应生成蓝色物质,因此,可以作为鉴定DNA的试剂。

目的要求

1.

学会DNA的粗提取和鉴定的方法。

2.

观察提取出来的DNA物质的颜色和形状。

材料用具

材料:活鸡或鲜血鸡血。

仪器:离心机、恒温水裕锅、载玻片,玻璃棒,滤纸,滴管,量简(100

mL,l个),烧杯(100

mL、500

mL各

试剂:酒精的体积分数为95%的溶液(实验前置于冰箱内冷却24

h),蒸馏水,柠檬酸钠的质量浓度为

0.1g/mL的溶液,氯化钠的物质的量浓度分别为

2mol/L和0.015

mol/L的溶液,试剂。

方法步骤

实验前需要制备鸡血细胞液(由教师完成),制备的方法是:取柠檬酸钠的质量浓度为

0.1

g/mL的溶液(抗凝剂)100

mL,置于500

mL烧杯中。将宰杀活鸡流出的鸡血(约180

1000

r/min的离心机离。2min,此时血细胞沉淀于离心管底部。实验时,用吸管除去离。心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液。

将制备好的鸡血细胞液5

mL~10mL,注入到50

mL,同时用玻璃棒充分搅拌5

min,使血细胞加速破裂。然后,用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至500mL。取其滤液。

2.溶解细胞核内的DNA

将氯化钠的物质的量浓度为

3.析出含DNA的粘稠物

沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水(这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于0.14

mol/L)。

4.滤取含DNA的粘稠物

用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至

500mL的烧杯中,含

DNA的粘稠物被留在纱布上。

5.将DNA的粘稠物再溶解

20mL。用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃择不停地搅拌,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中。

6.过滤含有DNA的氯化钠溶液

取1个100

mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液。取其滤液,DNA溶于滤液中。

在上述滤过的溶液中,加入冷却的、酒精的体积分数为

95%的溶液

。注意观察丝状物是什么颜色的。

8.DNA的鉴定

取两支20

mL的,各加入氯化钠的物质的量浓度为0.015

mol/L的溶液5

5min,待冷却后,观察并且比较两支中溶液颜色的变化。

dna的粗提取和鉴定中研磨液中加入SDS的作用?

(4)图c表示在滤液中加入冷却的95%的酒精,由于DNA不溶于酒精,而其它杂质可以溶于酒精,因此可以提取杂交更少DNA(或去除脂溶性杂质).

SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:

(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。

(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。次在提取血细胞核物质时进行过滤,取得的滤液中含有染色质,而滤出的是细胞膜、核膜和细胞器等的破碎结构

但是SDS能抑制核糖酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步作中 (用RNase去除RNA时)受到干扰。

如图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤,请据图分析回答:(1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料,这

2mol/L的氯化钠溶液存在的基本液体环境

(1)根据DNA粗提取实验中材料选择的原则,鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得(以及鸡血细胞极易吸水胀破),因此鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料.要从鸡血细胞中释放出核物质,需要向鸡血细胞中加入蒸馏水,让红细胞吸水涨破,并搅拌加速红细胞的破裂.

(2)图a表示释放核物质后进行过滤的过程,此时DNA溶解在氯化钠溶液中,因此过滤后取滤液进行下一步实验.

(3)图b表示的相关作过程中,加入2mol/LNaCl溶液的作用是溶解DNA分子.

故为:

(2)滤液

3、过滤3次(3)溶解DNA分子

(4)提取杂交更少DNA(或去除脂溶性杂质)

dna的粗提取和鉴定有几次搅拌

7.提取含杂质较少的DNA

: 解析: 解析: 考查DNA粗提取实验的作,属归纳性练习。 :次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液,目的是为了加速细胞(及核膜)破裂,DNA从细胞核中释放出来。 第二次搅拌2 mol/L氯化钠溶液的滤液的目的是为了加速DNA的溶解。 第三次搅拌加蒸馏水至0.14 mol/L氯化钠溶液是为了稀释NaCl溶液,析出含DNA的粘稠物。 第四次搅拌放入黏稠物的2 mol/L氯化钠溶液是为了使粘稠物尽可能多地溶于溶液中。 第五次搅拌体积分数为95%的酒精溶液是为了提取含杂质较少的DNA。

mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20

关于生物DNA粗提取和鉴定实验

而蛋白质溶解度随第三次是在DNA的鉴定中,目的是溶解DNA物质的量浓度减小而增大

下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述正确的是

1.提取鸡血细胞的细胞核物质

【】D

【解析】试题分析:DNA不能溶于酒精溶液,95%的冷酒精凝结效果,A错误;高温可以使蛋白质变性,而DNA不会变性,B错误;DNA在0.14m取1个ol/LNaCl溶液中溶解度小,C错误;在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA与蛋白质分离,D正确。

考点:本题考查DNA的粗提取和鉴定的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。

dna的粗提取与鉴定需要水浴加热吗

(1)鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得(以及鸡血细胞极易吸水胀破) 向鸡血细胞中加入蒸馏水,并搅拌

需要。用试剂鉴定DNA需要进行水浴加热,冷却后变蓝。脱氧核糖(英文DeoxyriboNucleicAcid,缩写为DNA)是生物细胞内含有的四种生物大分子之一的一种。

mL,2个),漏斗,夹,纱布。

下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是(  )A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料B.DNA既

第二次是在析出含DNA的粘稠物后,目的是稀释NACL溶液,使DNA逐渐析出

A、理论上只要含有DNA的生物组织均可作为该实验的材料,因此酵母和菜花均可作为提取DNA的材料,故A选项正确;

百度

B、DNA既可溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水,故B选项正确;

C、向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可使破裂细胞,释放DNA,但不会观察到玻棒上有白色絮状物,故C选项错误;

D、DNA溶液加入试剂沸水浴加热,冷却后变蓝,故D选项正确.

故选:C.

DNA的粗提取与鉴定为什么要用尼龙布过滤,而不用滤纸?

mL,l个,50

粗【】提取,过虑掉的是细细膜等较大杂质,DNA则留在虑液中,用虑纸时,就会连同DNA一起过虑,而得不到DNA

滤纸孔径比较小,而且有吸附性,DNA都被吸附到滤纸上了。

下列关于DNA的粗提取和鉴定的有关说法,正确的是

mL)注入烧杯中,同时用2mol的溶液40mL加入到滤液中,并摇动烧杯,使其混合均匀,这时DNA呈溶解状态。玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸钠溶液充分混合,以免凝血。然后,将血液倒入离心管内,用

C

点拨:本题考查DNA的粗提取和鉴定中相关步骤的易模糊点。需要对每一个选项认真分析,用排除法选择。从DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线可知,NaCl溶液在低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度增加而逐渐降低0.14 mol/L时溶解度,当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA溶解度逐渐增加。A选项只注重一般范围内的变化,不够全面。试剂使用时需要水浴加热才出现实验现象。猪的成熟红细胞没有细胞核,无DNA,故不能用于本实验。而提取洋葱的DNA时,食盐的作用是溶解释放后的DNA,洗涤剂才是使DNA从细胞中释放出来。

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